Материалы и методы исследования
Страница 1

При исследовании генетической изменчивости и таксономических взаимоотношений у трёх видов лиственниц Палеарктики нами был использован материал 160 деревьев из двух природных популяций лиственницы сибирской, одной популяций лиственницы даурской и одной популяции лиственницы Сукачева. Две исследованные природные популяции лиственницы сибирской расположены на территории Западной Сибири. Одна из них находится в смешанном горном лесном массиве Алтая, а другая в лиственничнике Западно-сибирской низменности, к северу от г. Томска. Проанализированная популяция так называемой лиственницы Сукачева представляет собой природное насаждение, расположенное на территории Центрального Урала. Семенной материал лиственницы даурской был собран с деревьев, произрастающих в лиственничнике недалеко от г. Хабаровска.

В качестве экспериментального материала при электрофоретическом фракционировании служили ткани гаплоидных эндоспермов и диплоидных зародышей. Для определения генотипа каждого дерева проводился анализ 10-20 эндоспермов, которые выбирались случайно из набора семян, полученного как минимум из пяти шишек, собранных из различных частей кроны дерева. Так как вероятность ошибочного отнесения гетерозиготных деревьев к гомозиготным рассчитывается из соотношения Р = 0.5 n–1 (где n – количество проанализированных эндоспермов), то даже при анализе 8 эндоспермов ошибка составляет менее 1%.

Электрофоретический анализ проводили в горизонтальных камерах в 13-14% крахмальном геле по методам, подробно описанным нами ранее (Гончаренко и др. 1989). Электрофорез проводили в трёх буферных системах: А – Трис - ЭДТА- боратная, рН 8,6; В – Трис-цитрат, рН 6,2 / Трис-НСl, рН 8,0; С – Трис-цитратная, рН 6,2. Название ферментов, кодовый номер согласно изданию “Номенклатура ферментов” (1979), предпочитаемая для анализа буферная система, а также количество используемых локусов приведены в табл. 1.

Таблица 1.

Ферменты, их кодовый номер, буферные системы и количество локусов, использованные для анализа популяций лиственницы сибирской, лиственницы Сукачева и лиственницы даурской.

Фермент

Аббревиатура

Кодовый номер

Буферная система

Количество

локусов

Аконитаза

АСО

4.2.1.3.

C

1

Аспартатаминотрансфераза

ААТ

2.6.1.1.

А

3

Глутаматдегидрогеназа

GDH

1.4.1.2.

A

1

Глюкозофосфатизомераза

GPI

5.3.1.9.

С

1

Изоцитратдегидрогеназа

IDH

1.1.1.42.

B

1

Лейцинаминопептидаза

LAP

3.4.11.1.

B

2

Малатдегидрогеназа

MDH

1.1.1.37.

C

4

Фосфоглюкомутаза

PGM

2.7.5.1.

A

2

Флюоресцентная эстераза

FL-EST

3.1.1.2.

B

1

6-фосфоглюконатдегидрогеназа

PGD

1.1.1.44.

C

2

Сорбитолдегидрогеназа

SDH

1.1.1.14.

A

1

Шикиматдегидрогеназа

SKDH

1.1.1.25.

B

1

Страницы: 1 2


Интересное на сайте:

Эмоции
Эмоции возникли в процессе эволюции человека и животных. Им принадлежит важная роль в формировании поведенческих реакций, стремлений и удовлетворении потребностей организма. Эмоции - это особая форма психической деятельности, которая в в ...

Протеинкиназа С
Это ключевой фермент системы передачи сигнала, запускаемого быстрым расщеплением фосфатидилинозитолов в плазматической мембране. Такие внеклеточные вещества, как нейромедиаторы, гормоны или факторы роста, связываются со специфическими рец ...

Структура и функция отдельных слоев сетчатки
Сетчатка - это внутренняя оболочка глаза, имеющая сложную многослойную структуру. Она содержит два вида различных по своему функциональному значению фоторецепторов (палочки, колбочки и несколько видов нервных клеток). Под воздействием све ...